自噬

刚开始去亦庄那边的一个合作实验室构建筛选的平台，细胞自噬研究是个很简单的方向，检测手段及对象定好了，很容易就能有新发现，加一点机制研究就能发文章，这个领域的文章不论大小基本都是这个套路，那几年也出了一些筛选方面的文章，基本上也是构建一个筛选平台筛个库，就能出新发现新结果，我们的思路也是一样的，只是筛选平台和库不一样。

在合作实验室初筛的时候，之前他们也做了一些自噬的研究，并发现了一个调控自噬的新基因，我想着GFP-p62这个也不浪费，如果结合那个新基因，合到一起可以发篇文章，但负责合作实验室的师兄不同意，我很奇怪他为什么不同意，因为他很看重文章之类的成果，只要大团队有谁要发文章或申请专利他都想尽办法要把他的名字加进去，这么容易的通讯作者文章他竟然拒绝了。

最后，在寻找这个基因调控细胞自噬的机制上，我没有找到一个完美或充分的解释，而仅仅是做了一些推测就发表了【4】，博士答辩的时候，有答辩老师问我为什么不投个好点的杂志，他认为至少可以发表在《autophagy》上，当时我只想着达到毕业要求尽快毕业就行了，顺利毕业更重要，我似乎和有的专业杂志无缘，也许是我太急于求成，而忽略了更长远的作用。

筛选出来的十多个基因，我只研究了其中一个来得巧合的膜蛋白TMEM208，但我没预料到这个基因不太好研究，在研究这个基因调控细胞自噬机制的过程中，我们用细胞自噬的两种抑制剂有时候竟然得到了相反的结果，最后我决定只用一种结果，另一个结果就不考虑了，毕竟我只是想顺利博士毕业。

筛选出来的十多个基因，我只研究了其中一个来得巧合的膜蛋白TMEM208，但我没预料到这个基因不太好研究，在研究这个基因调控细胞自噬机制的过程中，我们用细胞自噬的两种抑制剂有时候竟然得到了相反的结果，最后我决定只用一种结果，另一个结果就不考虑了，毕竟我只是想顺利博士毕业。

这个筛选工作只是初步工作，筛出来的基因还需要验证，其中一个验证出来的结果正好是相反的（促进自噬/抑制自噬），也许是筛选用的过表达质粒和单独验证的质粒的载体及插入片段不一样导致，筛选用的过表达质粒插入的是包含CDS区在内的更长的cDNA区域，而单独验证的质粒插入的片段只有CDS，两个质粒载体也不一样，不管是促进还是抑制，筛选平台把他筛选出来了，而筛选的目的就是寻找改变细胞自噬水平的新调控基因，所以目的是达到了，虽然验证的结果有点意外。

最后，在寻找这个基因调控细胞自噬的机制上，我没有找到一个完美或充分的解释，而仅仅是做了一些推测就发表了【4】，博士答辩的时候，有答辩老师问我为什么不投个好点的杂志，他认为至少可以发表在《autophagy》上，当时我只想着达到毕业要求尽快毕业就行了，顺利毕业更重要，我似乎和有的专业杂志无缘，也许是我太急于求成，而忽略了更长远的作用。