MN@EV/SC

图4系统评估了MN@EV/SC递送系统在小鼠体内的EVs滞留行为及其促进皮肤组织再生的能力。

在C57BL/6小鼠背部皮肤贴敷不同贴片后进行活体荧光成像，结果显示MN@EV/SC递送的EVs在皮肤局部可稳定滞留至少7天，且信号强度明显高于对照组(图4b)，说明该系统具备良好的持续释放能力。

组织冷冻切片进一步揭示，MN@EV/SC递送的EVs不仅穿透表皮层，还能深入分布于真皮和皮下组织，分布范围更广泛(图4d)。

图2系统评估了微针长度对皮肤穿透性、疼痛反应及贴附性能的影响，进一步验证了MN@EV/SC设计的合理性与优越性。

I双增强MN@EV/SC系统的构建与工作原理

MN@EV/SC系统在体内的递送效果及其EV释放行为评估：(a)C57BL/6小鼠体内生物分布实验的设计示意图与时间进程图。

以上结果充分表明，MN@EV/SC系统通过短微针与吸盘协同放大机制，显著增强了EV在皮肤内的分布深度与保留时间，在不引入外部能量的前提下实现高效、持续的生物活性物质递送，为皮肤疾病治疗和组织再生提供了可靠技术支持。

图3深入评估了MN@EV/SC系统在小鼠皮肤中的EVs递送效率与分布行为，进一步验证了其在体外与离体组织环境下的功能表现。

将本研究所开发的MN@EV/SC系统与已有微针递送系统的文献数据在针长与药物递送深度方面进行对比(图1f)，结果显示MN@EV/SC在短针条件下(300μm)实现了高达290μm的递送深度，显著优于传统系统，进一步验证了双放大策略在提升经皮递送效率与生物安全性方面的独特优势。

综合以上结果表明，MN@EV/SC系统可在无需外部能源或辅助设备的条件下，实现对真皮层的深层、高效且可控的EVs递送，为药物的经皮给药提供了切实可行的结构平台。

图1展示了仿生双增强贴片MN@EV/SC的构建及其工作原理。

MN/SC的特性：(a)通过MN@EV/SC实现的详细双重放大机制示意图；

免疫荧光染色结果进一步显示，MN@EV/SC处理可上调真皮成纤维细胞标志物ER-TR7的表达，显著抑制衰老相关蛋白p16和p21的表达，并降低ROS氧化应激水平(通过DHE染色检测)(图6g)，提示其具备调控真皮微环境、抑制细胞衰老的潜力。

HE染色与Masson染色结果显示，MN@EV/SC处理组的小鼠真皮层厚度显著增加(图6b)，图像定量分析进一步证实其显著优于其他对照组(图6c)，表明该系统具有促进皮肤结构重建的能力。

在胶原合成方面，MN@EV/SC处理组的真皮层中胶原含量占比及胶原体积分数均明显升高(图6e–f)，表明该系统对胶原再生具有显著促进作用。

IVEVs体内滞留表现与皮肤再生促进作用图4系统评估了MN@EV/SC递送系统在小鼠体内的EVs滞留行为及其促进皮肤组织再生的能力。

图4系统评估了MN@EV/SC递送系统在小鼠体内的EVs滞留行为及其促进皮肤组织再生的能力。

在功能层面，MN@EV/SC显著促进了成纤维细胞的迁移与增殖能力，增强了胶原蛋白的合成水平，同时有效降低了氧化应激引起的细胞损伤。

(d)MN@EV/SC的双增强作用机制示意图，展示皮肤层的纳米级形变及其对EV分布行为的影响。

所设计的MN@EV/SC结构通过短微针与仿生吸盘的协同作用，构建了多层级递送通道，有效促进EV穿透角质层并进入真皮组织(图3a)。

MN/SC的特性：(a)通过MN@EV/SC实现的详细双重放大机制示意图；

在离体小鼠皮肤实验中，EV可借助MN@EV/SC结构实现横向与纵向的扩散，广泛分布于微针周围区域，形成持续且稳定的释放模式(图3c、图3d、图3e)，其中递送深度和分布均匀性均显著优于未加载吸盘结构的对照组。