七氟醚

为了理解氢气对大脑保护作用背后的机制，我们研究了在七氟醚诱导的神经元死亡中受到H2影响的分子信号。

这些修改可能涉及H2对抗七氟醚诱导神经元死亡的保护机制中。

在这项研究中，我们调查了氢气在七氟醚诱导的神经元细胞死亡中影响的分子信号，以更好地理解氢气对大脑保护作用的机制。

(a)氢气抑制了七氟醚诱导的Fas、Ddit3、Hmox1和Jun转录增加以及Bcl2转录减少。

(a–g)代表性共聚焦显微镜图像显示，七氟醚诱导的CC3阳性细胞（红色），与抗NeuN(a)、抗GFAP(b)、抗巢蛋白(c)、抗CD31(d)、抗Olig2(e)、抗F4/80（绿色；

3.1七氟醚诱导的新生鼠大脑神经祖细胞凋亡

3.2氢气对七氟醚诱导凋亡的神经保护作用

3.2氢气对七氟醚诱导凋亡的神经保护作用为了评估氢气对七氟醚诱导凋亡的保护作用，新生小鼠被同时给予3%七氟醚，有或无2%氢气共处理3小时（分别为Sevo组和Sevo+H2组）。

3.4氢气对七氟醚激活的c-Jun通路具有抑制作用为了阐明氢气对七氟醚诱导凋亡保护作用的分子机制，我们首先通过qPCR检查了皮层中基因表达的变化。

3.5氢气抑制七氟醚诱导的氧化应激

3.5氢气抑制七氟醚诱导的氧化应激c-JunN端激酶（JNK）模块在凋亡中起着重要作用，并且由氧化应激激活。

3结果3.1七氟醚诱导的新生鼠大脑神经祖细胞凋亡我们首先在暴露于七氟醚的新生小鼠大脑中识别出凋亡细胞。

为了评估氢气对七氟醚诱导凋亡的保护作用，新生小鼠被同时给予3%七氟醚，有或无2%氢气共处理3小时（分别为Sevo组和Sevo+H2组）。

为了阐明氢气对七氟醚诱导凋亡保护作用的分子机制，我们首先通过qPCR检查了皮层中基因表达的变化。

之前有报道称，氢气对七氟醚诱导的神经元凋亡的保护作用是浓度依赖性的，从0到1.3%。

免疫印迹显示，氢气倾向于减少皮层中七氟醚诱导的c-Jun磷酸化和蛋白质丰度的增加（图4c）。

免疫染色和TUNEL检测显示，氢气倾向于减少七氟醚诱导的CC3和TUNEL阳性细胞增加（图2a-c）。

因此，我们推测H2通过调节细胞运输来减轻七氟醚诱导的凋亡。

因此，我们检查了c-Jun的磷酸化情况，发现H2减少了七氟醚诱导的磷酸化增加。

图1七氟醚诱导楔前皮质神经祖细胞凋亡。

图2氢气在楔前皮质对抗七氟醚诱导的凋亡中发挥神经保护作用。

图5氢气抑制七氟醚诱导的氧化应激。

在我们的实验中，全面定量的磷酸化变化揭示，几个七氟醚诱导的过度和低磷酸化蛋白与微管网络和细胞骨架重塑有关，这可能是麻醉剂和未成熟神经元凋亡效应的基础。

幼鼠暴露于混合麻醉气体3小时，然后暴露于空气3小时。

幼鼠（n=24）分为三组：对照组（n=6）以及暴露于含2%氢气（n=9）或不含2%氢气（n=9）的七氟醚3小时。

我们确认，在新生小鼠大脑中，经历七氟醚诱导凋亡的细胞是楔前皮层中的巢蛋白阳性神经前体细胞，这在大鼠模型中被报道特别受到缺氧缺血的影响。

我们观察到，与Sevo组相比，Sevo/Air组中七氟醚诱导的CC3和TUNEL阳性细胞约增加了两倍（图2a-c）。

接下来，我们研究了在Sevo/Air组中，哪种浓度的氢气最能保护神经祖细胞免受七氟醚诱导的凋亡。

氢气抑制七氟醚诱导的氧化应激。

氢气抑制了神经祖细胞中七氟醚诱导的c-Jun表达增加。

这些结果表明，在七氟醚诱导的大脑损伤和缺血再灌注实验中，1–8%的氢气具有最强的神经保护作用。

（a）代表性显微镜图像显示，幼鼠暴露于含或不含2%氢气的混合麻醉气体后，楔前皮质中七氟醚诱导的CC3阳性细胞与核染色素复染（上方）和TUNEL阳性细胞（下方）。

我们发现，将神经母细胞暴露于氢气中1小时，会暂时性且可逆地增加几种磷脂的水平，抑制与能量生产相关的代谢途径，并同时增加微弱的氧化应激。

此外，新生小鼠在吸入七氟醚期间吸入氢气6小时，可以抑制七氟醚引起的氧化应激增加、神经元凋亡以及随后的神经行为缺陷。

为了排除吸入氢气影响这些参数的可能性，我们测量了吸入2%氢气和七氟醚的小鼠的血流量（图3d,e）和血液氧气水平（图3f）。

一项研究报告称，七氟醚增加了成年大鼠肺部的丙二醛，但减少了肾脏和大脑中的丙二醛。

此外，一项对接受尿道下裂修复手术的幼儿（12-36个月大）的研究发现，手术2小时后七氟醚增加了抗氧化酶的mRNA水平，表明七氟醚暂时增加了儿童的氧化应激。

此外，七氟醚增加了c-JunmRNA和蛋白质水平，而这种增加被H2显著降低。

相反，另一项研究报告称，七氟醚增加了新生大鼠海马中的ROS水平和氧化DNA损伤。

图3氢气吸入对血流和氧气水平的影响。

我们在6天大的小鼠暴露于3%七氟醚3小时后，主要在发育缓慢的楔前皮质（随着动物学会在环境中导航而发育）观察到抗CC3抗体染色或TUNEL阳性的凋亡细胞（图1）。

我们的数据显示，暴露于七氟醚3小时增加了新生大脑中的脂质过氧化和氧化DNA损伤。

将1-8%的H2气体与七氟醚一同给药3小时，可以抑制因氧化应激而升高的caspase-3介导的凋亡性细胞死亡，并同时减少c-Jun磷酸化和c-Jun通路的激活。

为了理解氢气对大脑保护作用背后的机制，我们研究了在七氟醚诱导的神经元死亡中受到H2影响的分子信号。

我们发现，将神经母细胞暴露于氢气中1小时，会暂时性且可逆地增加几种磷脂的水平，抑制与能量生产相关的代谢途径，并同时增加微弱的氧化应激。

此外，新生小鼠在吸入七氟醚期间吸入氢气6小时，可以抑制七氟醚引起的氧化应激增加、神经元凋亡以及随后的神经行为缺陷。

这些修改可能涉及H2对抗七氟醚诱导神经元死亡的保护机制中。

(a)氢气抑制了七氟醚诱导的Fas、Ddit3、Hmox1和Jun转录增加以及Bcl2转录减少。

一项研究报告称，七氟醚增加了成年大鼠肺部的丙二醛，但减少了肾脏和大脑中的丙二醛。

免疫印迹显示，氢气倾向于减少皮层中七氟醚诱导的c-Jun磷酸化和蛋白质丰度的增加（图4c）。

免疫染色和TUNEL检测显示，氢气倾向于减少七氟醚诱导的CC3和TUNEL阳性细胞增加（图2a-c）。

因此，我们检查了c-Jun的磷酸化情况，发现H2减少了七氟醚诱导的磷酸化增加。

在这项研究中，我们调查了氢气在七氟醚诱导的神经元细胞死亡中影响的分子信号，以更好地理解氢气对大脑保护作用的机制。

3.2氢气对七氟醚诱导凋亡的神经保护作用

3.2氢气对七氟醚诱导凋亡的神经保护作用为了评估氢气对七氟醚诱导凋亡的保护作用，新生小鼠被同时给予3%七氟醚，有或无2%氢气共处理3小时（分别为Sevo组和Sevo+H2组）。

3.4氢气对七氟醚激活的c-Jun通路具有抑制作用为了阐明氢气对七氟醚诱导凋亡保护作用的分子机制，我们首先通过qPCR检查了皮层中基因表达的变化。

为了评估氢气对七氟醚诱导凋亡的保护作用，新生小鼠被同时给予3%七氟醚，有或无2%氢气共处理3小时（分别为Sevo组和Sevo+H2组）。

为了阐明氢气对七氟醚诱导凋亡保护作用的分子机制，我们首先通过qPCR检查了皮层中基因表达的变化。

之前有报道称，氢气对七氟醚诱导的神经元凋亡的保护作用是浓度依赖性的，从0到1.3%。

图2氢气在楔前皮质对抗七氟醚诱导的凋亡中发挥神经保护作用。

这些结果表明，吸入H2不影响七氟醚的麻醉效果，且上述生理参数不涉及H2诱导的神经保护机制。