马克斯克鲁维酵母

马克斯克鲁维酵母是一种极具工业生物技术应用潜力的耐热酵母，但长期缺乏高效的基因组工程工具。

图6SDHs单基因敲除对马克斯克鲁维酵母生长和琥珀酸合成的影响

应用该系统，研究系统解析了琥珀酸脱氢酶（SDH）基因SDH1-SDH5的功能，通过组合敲除SDH基因将碳通量定向引流至丁二酸合成途径，针对副产物积累问题进一步敲除GPD1/ACH1/ADH2A、过表达NDE1，最终获得的工程菌株在37℃以葡萄糖为底物可合成32.38g/L丁二酸，为目前已报道的马克斯克鲁维酵母中最高产量，同时乙醇、乙酸、甘油副产物分别降低60.79%、89.24%、67.5%；

最终构建的工程菌株YZH43，在37℃以葡萄糖为底物的摇瓶发酵中，丁二酸产量达到32.38g/L，为目前已报道的马克斯克鲁维酵母中的最高水平，同时乙醇、乙酸、甘油三种主要副产物的积累量分别降低了60.79%、89.24%与67.5%，大幅降低了后续产物分离纯化的成本。

本研究为马克斯克鲁维酵母提供了一套高效的CRISPR/Cas12a编辑平台，为高附加值化学品的生物合成提供了有力支撑。